兔单抗制备|兔单抗制备方法-卡梅德生物

发布时间:2024年01月02日

兔单抗的制备方法主要包括以下几个步骤:

1. 选择免疫原:选择具有免疫原性的物质作为免疫原,如蛋白质、多肽、糖类、脂类等,以引发兔的免疫反应。
2. 兔免疫:将选定的免疫原与佐剂混合,注射到兔体内,以引发免疫反应。佐剂可以提高免疫原性,增强免疫反应。
3. 细胞融合:将免疫后的兔脾细胞与骨髓瘤细胞融合,形成杂交瘤细胞。这一步通常需要使用细胞融合技术,如聚乙二醇(PEG)法或电融合法。
4. 筛选杂交瘤细胞:筛选出能够产生所需抗体的杂交瘤细胞,并进行克隆化培养。
5. 抗体纯化:从杂交瘤细胞培养液或兔血清中分离出单克隆抗体,并进行纯化。常用的纯化方法包括凝胶过滤法、离子交换法、亲和层析法等。
6. 抗体检测:通过抗原-抗体反应检测单克隆抗体的特异性。可以使用放射免疫分析法、酶联免疫吸附法(ELISA)、荧光免疫分析法等方法进行检测。
7. 抗体鉴定:对单克隆抗体的特异性、亲和力、滴度等进行鉴定,以确保制备的抗体符合要求。
8. 抗体扩增与冻存:将筛选得到的杂交瘤细胞在体外培养或注射到动物体内进行扩增,以获得更多的抗体。同时,为了长期保存抗体,可以将抗体冻存在-20℃或-80℃的冰箱中。

总之,兔单抗的制备需要经过多个步骤,每个步骤都需要严格的操作和质量控制,以确保最终获得的抗体符合要求。

文章来源:https://blog.csdn.net/g20231908/article/details/135342415
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